试验室安全工作基本守则

  
评论: 更新日期:2018年08月18日


        2.8特殊安全试剂使用结束后,严禁放置在公共实验室。
        2.9粉尘较多的实验室,应注意消除静电,并适当通风。
        三、仪器设备安全使用知识
        1. 高效液相色谱仪安全使用知识
            1.1使用前应留意流动相体积及贮存瓶的密封性
        1.2 泵运行时才能设置柱温箱升温,柱温较高时,禁止过夜使用。
        1.3整个流路中在实验完毕时不能存留缓冲盐溶液,如是C18柱,最后用有机相保存柱子。
        1.4时刻关注废液缸的容量,防止废液溢出。
        2.Malvern Zetasizer Nano-ZS安全使用知识
        2.1 当天首次使用时,应预热半小时后再行使用。
        2.2 样品池一定要擦拭干后放入样品池。
        2.3 每天仅开机关机一次,单次使用完成后,不用关闭电源。
        3. 冷冻干燥机安全使用知识
        3.1 启动制冷机,一般要预冷30分钟以上。
        3.2启动真空泵以前,检查出水阀是否拧紧,充气阀是否关闭,有机玻璃罩与橡胶圈的接触面是否清洁无污物,良好密封;启动真空泵后,应待气压数显稳定后,方可离开。
        3.3按住控制面板的充气阀,再关闭真空泵。
        3.4气压数显为大气压时,打开有机玻璃罩,取出样品。
        3.5关闭制冷机,按住总开关键三秒以上,最后关闭总电源开关。
        3.6等冷阱中的冰完全化成水后,打开机箱左侧的出水阀放水,并用干布清洁冷阱内壁,盖上大张滤纸防尘。
        3.7制备样品应尽可能扩大其表面积,其中不得含有酸碱物质和挥发性有机溶剂。
        3.8 样品必须完全冻结成冰,如有残留液体会造成气化喷射。
        3.9 一般情况下,该机不得连续使用超过48小时。
        4. 多模式活体成像仪安全使用知识
        4.1 试验前应关注光源和风扇是否运行正常。
        4.2 操作结束后,应正常关闭程序,否则光源会一直工作,导致机箱过热。
        4.3 使用麻醉机前,应检查管路是否正常,防止麻醉剂挥发。
        5. 喷雾干燥机安全使用知识
        5.1小型喷雾干燥机闭式操作过程中,喷有机溶剂(如乙醇,二甲苯等)时,氧气浓度必须控制在5%以下(可通过再次导入N2或重新开机,使氧气浓度达要求值),否则有机溶剂有燃烧、爆炸的危险。
        5.2小型喷雾干燥机在运转中,不要触摸旋转部件(雾化器、雾化盘、皮带、电机风叶)。
        5.3小型喷雾干燥机运转中或停机后一段时间内,小型喷雾干燥机表面温度比较高,请不要用手去触摸袋滤器、旋风分离器、风管、雾化器、排风机、观察窗等部件。
        5.4关机时,先关闭进口温度加热开关,保持吸气机工作;等到出口温度降到70℃以下,方可关闭吸气机。
        5.5应定期查看溶剂回收瓶中的溶剂,并倒出。
        5.6 本仪器需要拆卸清洗的部件均为玻璃材质,所以清洗过程要十分小心,不要碰撞。
        6. 高压灭菌器使用注意
        6.1应由受过良好培训的人员负责高压灭菌器的操作和日常维护。
        6.2应做好预防性的经常维护工作,包括:由有资质人员定期检查灭菌器柜室、门的密封性以及所有的仪表和控制器。
        6.3应使用饱和蒸汽,并且其中不含腐蚀性试剂或其他化学品,这些物质可能会污染正在灭菌的物品。
        6.4所有要高压灭菌的物品都应放在空气能够排出并具有良好热渗透性的容器中;物品放置不宜过紧,周边应留有空隙以提高灭菌效果。
        6.5必须将灭菌器内冷空气充分排除,否则温度达不到规定温度,影响灭菌效果。
        6.6当灭菌器内部加压时,互锁安全装置可以防止门被打开。而没有互锁装置的高压灭菌器,应当关闭主蒸汽阀并待温度下降到80℃以下时再打开门。
        6.7灭菌完毕后,不可放气减压,须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可打开。操作者打开灭菌器门时应当穿戴适当的手套和面罩进行防护。
        6.8装培养基的试管或瓶子的棉塞上,应包油纸或牛皮纸,以防冷凝水入内。敷料、器械和器皿消毒后需干燥。
        6.9当高压灭菌液体时,灭菌结束后不能立即放气,停止加热使其自然冷却,待压力降至零后再放气,冷却后再取出。
        6.10灭菌器的排水过滤器(如果有)应当每天拆下清洗。
        四、药剂学系细胞培养室管理规定
        细胞培养室是进行各种细胞培养的净化级实验室,所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度,接受实验室管理人员的管理。
        1. 常规操作
        1.1 穿着专用实验服。实验人员必须在细胞室缓冲间内更换细胞室专用实验服,严禁不穿实验服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞室。
        1.2 穿着专用拖鞋。在准备间换下自己的鞋子,尽量避免在缓冲间走动、停留。
        1.3 实验过程中严禁喧哗,闲聊,反复进出培养室。
        2. 培养箱使用规则
        2.1 从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。
          注:培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
        2.2 从培养箱拿取细胞时轻拿轻放,动作迅速,随手关紧培养箱门。未经允许,禁止翻看、移动他人细胞或样品,如有特殊需要的,请联系实验室负责人协调。
        2.3 培养瓶皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
        2.4 普通培养中的细胞,若非实验特殊需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
        注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
        2.5 实验人员应经常注意检查培养箱温度、CO2气体量是否符合设定值。密切注意培养箱内的增湿盘,定期更换无菌水并进行消毒。密切注意培养箱内情况,如出现霉变、菌斑、支原体和衣原体感染或其他明显染菌迹象,应立即通知管理员及其他使用者。
        3. 显微镜使用规则
        3.1 倒置相差显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
        3.2 离开细胞室时或较长时间不使用时,及时关上电源,延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。
        3.3 一次细胞实验使用完毕后,在显微镜使用记录本上登记。
        3.4 荧光显微镜属于贵重仪器,需遵循贵重仪器预约使用规程。
        4. 超净台相关操作规则
        4.1 超净台使用遵循预约原则。在细胞室入口处预约,细胞室内填写使用登记。
        a:无预约者若有必要在他人预约时段内使用,需先征得预约者的同意,否则应无条件让出工作台,以免耽误他人实验。
        b:使用记号笔在预约表格上提前预约下一周的使用时间,以周一为每周的第一天。
        c:预约内容包括:时间范围,姓名,如特殊实验请写明。
        4.2 超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌,使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒,所有物品放入超净台内使用前均应消毒,超净台内严禁堆放过多物品而影响风路平衡。不同超净台之间物品严禁频繁交换使用。
        4.3 点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3。
        注: 消毒用75%的酒精,酒精灯用95%以上的酒精,向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
        4.4 超净台中应摆放废液杯,用于暂时存放废弃物,实验结束后将杯内加入NaOH溶液处理片刻,废液垃圾倒入水池并同时用水冲释,固体垃圾倒入生物样品专用垃圾桶中。
        注:废液缸应及时处理,严禁长时间放置,以免其中的培养液滋生细菌。
        4.5 细胞实验后任何含有细胞培养污物的培养瓶,离心管,移液管等必须及时带出细胞房。
        5. 器具的清洗规则
        5.1 可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等,放入装有清水的塑料桶中浸泡,桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。
        注:可回收器皿应先初步涮洗后再放入桶内,尤其是培养瓶或血清管中有大量高营养的液体残留时,容易使桶内的清水长菌。保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满,而不是在装有大量空气的情况下被压倒桶底。  
        5.2 清水冲洗后及时放入酸缸浸泡,应由使用者本人及时清洗晾干备用,操作时请注意带橡胶手套,小心操作。
        注:禁止长时间浸泡于清水中,此时细菌可能已在桶中生长并释放内毒素。细菌内毒素很难通过常规湿热灭菌步骤去除干净,即使干烤也不能保证其完全失活。内毒素对细胞生长及多种实验均有较大影响。
        5.3洗涤程序:清水冲十次以上去除重金属残留,然后冲去离子水5次,再用超纯水5次,倒置于烘箱中晾干。并及时包扎灭菌。
        6. 冰箱、试剂等相关操作规则
        6.1 从冰箱取放物品动作要迅速,关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。严禁长时间敞开冰箱门。
        6.2 各人存放于冰箱内的培养液、生化试剂、样品要注明姓名、配制日期、样品名称,特殊试剂需获得细胞室管理人员同意后方能放置。不得使用他人的培养液或其他生化试剂。
        6.3 分装好的血清长时间保存于-80℃,使用前放于4℃预解冻。原则上解冻好的血清应全部配成含血清的培养基备用,若有剩余,则暂存于4℃并尽快使用。尽量不要使用他人开过的血清,以免交叉污染。
        6.4 细胞室内的冰箱空间有限,尽量仅放置使用频率较高的试剂。请勿将一些闲置试剂,污染试剂长期放置在细胞室。
        6.5 工作人员会定期对冰箱进行清理,发现无标记,过期试剂等违规物品将全部清除出去,并且查找试剂配置人给予警告。
        7. 进入细胞室物品控制
        7.1 所有进入细胞室的物品需经过传递窗,尽量经过紫外照射,酒精表面消毒。
        7.2 严禁将可能含有污染物或病原菌的实验物品带入细胞室。
        7.3 细胞室内仅放置少量实验必须耗材即可,不得整箱搬入,出现洁净室内物品堆积状况。
        7.4 细胞室内储物柜的物品放置由相关管理人员安排,并做标记。
        8. 细胞室清洁守则
        8.1 日常维护:注意培养箱显示正常,显微镜、冰箱、超净台的正常使用与维护。细胞室内以及门口生物样品专用垃圾桶的及时清理。
        8.2 每周大清洁:每周五下午五点用新洁尔灭打扫细胞室。
        清洁顺序:擦超净台(用酒精棉球);用新洁尔灭擦桌面,培养箱,超净台以及冰箱外壁,及桌上的仪器,细胞室墙面,传递窗,风淋室;给水浴锅加水或换水,细胞室衣柜和拖鞋摆放整齐,拖地,紫外消毒细胞室30分钟。
        注:若上周值日生及时给培养箱内水槽加足水,根据经验未来一周内培养箱不会干水,但值日生仍应经常检查,以便及时发现异常情况。切记给培养箱加灭菌水。
        8.3 在没有出现问题的情况下,每2个月清洁一次培养箱:先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内,对于比较敏感的细胞可以暂存于另一个培养箱;将培养箱内的不锈钢板取出,包括4块横板和左右2块立着的架子,用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁;启动培养箱自消程序。
        9. 人员培训
        9.1 参加细胞实验的人员,需通过医学部细胞培养的学习和考核,方准进入实验室。
        9.2培训不合格者重新参加培训。
        10. 制度的实施与处罚
        10.1 细胞室负责人以及管理人员密切关注细胞室的使用情况,发现违反规章操作者首先给予提醒,但须做记录。
        10.2 对于一周内违反2次以内者予以警告,3-5次者给予停止细胞室使用权限2周,超过5次者停用其对细胞室使用权限,需重新参加培训后才能再次使用。
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