毒灭菌实是采用多种物理、化学或生物学方法使细菌的生长代谢活动受到抑制、甚至死亡。消毒灭菌在医学实践上有着重要意义：可切断传播途径、控制感染扩散造成的危害；也可杀灭物品或器皿上的细菌，防止医院感染；是保证感染的病原学检验不受外来微生物污染的前提。

1.常用术语：

（1）灭菌  是破坏和去除物体上所有微生物（包括病原微生物和非病原微生物）和细菌芽胞的方法。如外科器械、注射器、基础培养基灭菌等。

（2）消毒  是破坏物体上活的病原微生物的方法，但不包括细菌芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡体温计、洁而灭液擦拭检查台等。用于消毒的化学物品称消毒剂。一般而言，消毒对象是指物体而不是机体。

（3）防腐  直接使用防腐剂破坏或抑制活病原微生物方法。如外科手术前碘液擦洗皮肤、双氧水清创伤口或杀菌肥皂清洗双手等应当使用该术语。

（4）无菌  防止感染病原体进入灭菌组织或物品的操作技术称无菌操作，无菌即为不存在活微生物。

2.物理消毒灭菌法

（1）热力消毒灭菌法  利用高热使蛋白质分子运动加快，肽链连接键断裂，蛋白变性凝固，细胞膜功能受损致胞内物质漏出，细菌内外环境平衡失调，从而导致微生物死亡。不同种类微生物对热的耐受力不同，有芽胞细菌对高温有强的抵抗力。热力灭菌分干热灭菌法和湿热灭菌法两大类，相同温度下，湿热环境中菌体蛋白易凝固，穿透力比干热大，其蒸气变为液态时可释放潜热，迅速提高被灭菌物体的温度。

1）干热灭菌法  包括：①焚烧：直接点燃或在焚烧炉内进行，仅适用于废弃物品或动物尸体。②烧灼：直接以火焰灭菌，适用于微生物学实验室接种环、针和试管口等灭菌。③干烤  在干烤箱内进行，加热至150℃~180℃2~4h达到灭菌效果，适用于高温下不变质、不被破坏和不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器，不能用于塑料、棉、纸制品。

2）湿热灭菌法  包括：①巴氏消毒法：是用较低温度杀灭液体中的病原微生物或特定微生物而保持物品中所需的不耐热成分的方法。大多采用71.6℃加热15秒，用于牛乳消毒。②煮沸法：在一个大气压下，煮沸后的水温度达100℃，煮沸5min后可杀死一般细菌繁殖体。③流通蒸气消毒法：又称常压蒸气消毒法，常用阿诺（Arnold）流通蒸气灭菌器或蒸笼，利用1个大气压下100℃水蒸气进行消毒，10~30min后细菌繁殖体被杀死，但对芽胞作用不大。④间歇灭菌法：采用间歇方式达到灭菌目的。将灭菌物品置于阿诺流通蒸气灭菌器内，100℃加热15~30min，每日一次，连续三次。每次灭菌后取出物品置37℃孵育箱过夜，致残存的芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸气灭菌器加热而被杀灭。如此反复以达到杀灭芽胞又使不耐高温的物质免受影响。常用血清凝固器对吕氏血清培养基和鲁琴培养基的灭菌属此方法。⑤高压蒸气灭菌法  利用密闭的耐高压蒸气灭菌器，在蒸气不外溢的条件下，使锅内压力增高，随之蒸气温度也增高。通常在103.4kpa压力下蒸气温度达到121.3℃， 维持15~20min可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。

（2）辐射法

1）电离辐射  能产生电离辐射效应的有X射线、Γ射线、阴极射线。受照射后，敏感的靶物质如细菌DNA吸收了射线产生能量，产生较大范围的突变，或产生毒性物质如自由基可破坏微生物核酸产生致死作用。电离辐射由于灭菌时不产生热量又称“冷灭菌法”，适用于对热敏感的物品及化学物质的灭菌，如一次性医用塑料制品和移植组织（骨、皮肤、心瓣膜等）和食品灭菌。

2）非电离辐射

①紫外线  杀菌紫外线波长为240~280nm，它作用于DNA链上相邻两个胸腺嘧啶或胞嘧啶，共价结合形成二聚体而干扰DNA复制与转录，导致细菌的死亡。紫外线穿透力弱，故常用于空气消毒和不耐热物品表面消毒。

②微波  是波长为1~103 nm的电磁波，可穿透玻璃、陶瓷、塑料薄膜等物质，常用于检验室用品、食品食具、药杯及其他用品的消毒。

（3）声波  超声波的空化作用破坏了细菌原生质胶体状态导致细菌裂解。革兰阴性菌对其敏感。主要用于细菌细胞粉碎以提取细胞的组分或制备抗原。

（4）滤过除菌法  以物理阻留的方式将液体或空气中的微生物除去以达到无菌目的。用于不耐高温物品如血清、抗毒素、抗生素等的灭菌，超静工作台和层流室空气也用滤过法除菌。

3.化学消毒灭菌法  化学药物使菌体蛋白变性沉淀、干扰微生物酶系统影响其代谢和损伤细菌细胞膜，导致菌体内容物漏出，而发挥防腐、消毒和灭菌作用。只能外用或用于环境物品的消毒。

（1）化学消毒剂的种类：

1）根据化学结构与性质不同分类  可以分成酶类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂、染料、酸碱类等。

2）根据杀灭微生物作用强弱分类：

①高效消毒剂  可杀灭一切微生物。如戊二醛、甲醛、环氧乙烷、过氧乙酸等。

②中效消毒剂  杀灭除芽胞以外的微生物。如乙醇、碘伏等。

③低效消毒剂  不能杀灭芽胞、结核分枝杆菌。如氯己定、苯扎溴铵等。

影响消毒剂效能的因素  通常消毒剂的浓度和作用时间与消毒剂杀灭微生物的效能成正相关，但也有例外，如乙醇，其浓度为70~75%时杀菌力最强。影响消毒剂作用的因素有①消毒剂的性质、浓度和作用时间；②微生物的种类与数量；③温度与湿度；④酸碱度；⑤环境中有机物存在的拮抗；⑥其他化学拮抗物质。

（3）常用化学消毒剂的应用

①卤素化合物  是有效的杀菌和灭菌剂，用于水、食品、设施消毒。如碘伏常用作于皮肤的除菌。

②酚类化合物  是强效杀菌剂，通常用于物品消毒。

③醇类  一般起抑菌作用。

④过氧化氢  用于伤口防腐和器具消毒。高浓度的过氧化氢有杀灭芽胞性能。

⑤表面活性剂  用于皮肤粘膜除菌和器具消毒。

⑥醛类  破坏微生物酶系统，有潜在灭菌作用。

⑦烷化剂  具高效的杀菌性能，是高效杀菌剂。