判定疲劳主要是观察疲劳的各种表现。疲劳首先表现在作业能力的下降或力不从心，并有思维涣散，注意力、记忆力、灵敏性趋于迟钝，从而导致作业速度下降，动作的正确性丧失，生产率下降，腰酸背痛，不愿动作等疲倦感觉。进一步出现工作困难，操作失灵，思考力、应变能力减弱，思想混乱，情绪消沉，食欲降低、口渴，体重减轻，心率加速， 神经系统功能异常，如头晕、头疼、瞌睡失眠，以致出现残次品或发生事故，严重者还可能丧失劳动能力。

还可以从劳动强度、时间、能量与氧的消耗程度，结合可能产生疲劳的原因间接判断作业中有无疲劳出现。

另外，通过测量血液和组织液的成分变化，如乙酸胆碱、五羟色胺、乳酸、二氧化碳等，来判定人的疲劳情况。