本标准适用于生产和使用磷胺的各类企业。
　　1　卫生要求
　　车间空气中磷胺最高允许浓度为0.02mg/m³(皮)。
　　2 监测检验方法
　　本标准的监测检验方法采用酶化学法，见附录A。

　　附录A
　　酶化学法(补充件)
　　A.1　原理
　　磷胺对胆碱酯酶有抑制作用，而胆碱酯酶能促进乙酰胆碱的水解，乙酰胆碱的量可用氯化铁比色法定量测定，由此换算成磷胺的含量。
　　本法的检出下限为0.1μg/mL。
　　A.2　仪器
　　a. 多孔玻璃板吸收管。
　　b. 恒温水浴箱：37±0.5℃。
　　c. 秒表。
　　d. 分光光度计。
　　e. 个体采样器。
　　A.3　试剂
　　A.3.1　吸收液：蒸馏水。
　　A.3.2 缓冲液(pH=7.2)：将16.72g磷酸氢二钠(Na₂HPO₄·12H₂O)及2.72g磷酸二氢钾(KH₂PO₄)溶于1L水中。
　　A.3.3　氯化乙酰胆碱溶液：称0.1000g氯化乙酰胆碱，溶于100mL缓冲液(pH=7.2)，保存于冰箱内。
　　A.3.4　碱性羟胺溶液：临用前将下列溶液(1)及(2)等体积混合。
　　溶液(1)：13.9%盐酸羟胺溶液，保存于冰箱内。
　　溶液(2)：14%氢氧化钠溶液。
　　A.3.5　三氯乙酸溶液：10g三氯乙酸溶于100mL1∶2盐酸中。
　　A.3.6　10%氯化铁溶液：将10g氯化铁(FeCl₃·6H₂O)加到0.84mL盐酸及少量水中，微热使溶解，然后加水至100mL。
　　A.3.7　标准溶液：准确称取磷胺的纯品，溶于甲醇中，配成1mL含100mg磷胺的贮备液，保存于冰箱中，临用时取适量贮备液用吸收液稀释配成1mL含2μg磷胺。
　　A.3.8　胆碱酯酶溶液：以健康马血清为酶原，用缓冲液稀释成酶活力为70％－80％(见酶活力测定)，保存于冰箱中。
　　酶活力测定：取3mL健康马血清置于25mL容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度，以此马血清溶液按表A1配制酶活力标准管。各管分别加1mL水，置于37℃恒温水浴箱预热10min，然后向每管各加入1.0mL氯化乙酰胆碱溶液(每隔30s加一管)，准确地在37℃下反应30min，30min末，加入2mL碱性羟胺溶液(每隔30s加一管)，按顺序从水浴中取出强烈振摇4min，然后向各管加入1mL三氯乙酸溶液，摇匀后，加入1mL氯化铁溶液，振摇过滤，滤液在波长为520nm下测其吸光度，以水作参比液。用公式(B-X)/B×100(%)(式中B为零管的吸光度，X为各管的吸光度)，得到氯化乙酰胆碱在37℃被酶水解30min的水解百分数，取水解百分数为70-80%的马血清作标准，根据马血清含量(25mL中含纯马血清毫升数)配制胆碱酯酶溶液。
　　表A1　酶活力标准管的配制
　　

　　A.4　采样
　　取盛有5ml吸收液的多孔玻璃板吸收管做采样管，以0.5L/min的速度抽取10L空气。
　　A.5　分析步骤
　　用吸收管中吸收液洗涤进气管内壁3次，然后倒入10mL具塞比色管中，取1.0mL样品溶液置于25mL具塞比色管中，同时按表A2配制标准管。
　　表A2　磷胺标准管的配制
　　
　　B管加1mL缓冲液，样品管和标准管(包括B管)放在37℃恒温水浴箱中预热10min，然后各管(除B管外)加入1.0mL胆碱酯酶溶液，每隔30s加一管，在恒温水浴箱中准确反应30min再向各管加入1.0mL氯化乙酰胆碱溶液(每隔30s加一管)，反应30min后(不时摇动)，每管加入2mL碱性羟胺溶液(每隔30s加一管)，按顺序从水浴中取出后强烈振摇4min，然后向各管中加入1mL三氯乙酸溶液，摇匀，加入1mL氯化铁溶液，振摇过滤，滤液在波长520nm下测其吸光度，并以水作空白参比液，将所得吸光度按下式计算出胆碱酯酶被磷胺抑制的百分数(或称百分抑制率)。
　　胆碱酯酶百分抑制率(%)=[1-(B-X)/(B-C)]×100
　　=(X-C)/(B-X)×100 ………………(A1)
　　式中：B、C——对照管B和C管的吸光度；
　　X——样品管的吸光度。
　　用磷胺含量对相应的胆碱酯酶百分抑制率绘制标准曲线，计算出样品的百分抑制率，再由标准曲线查出磷胺含量。
　　X=5C/V₀ ………………(A2)
　　式中：X——空气中磷胺的浓度，mg/m³；
　　C——所取样品溶液中磷胺的含量，μg；
　　V₀——换算成标准状况下的采样体积，L。
　　A.6　注意事项
　　A.6.1　每一批马血清，须测定其活力，如血清在冰箱中保存时间超过一个月，必须重新测酶活力。
　　A.6.2　磷胺标准液只能当日稀释，当日使用，放置24h后就会有部分水解，使浓度降低；现场采得样品，应避光保存，并须在24h内进行分析。

　　附加说明：
　　本标准由全国卫生标准技术委员会劳动卫生标准分委会提出。
　　本标准由上海市卫生防疫站负责起草。
　　本标准主要起草人陈因久、杨士兴、庄建国、殳家豪。
　　本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。